Detectarea amibelor libere în diverse prelevate prin metoda cultivării pe mediu special

Descriere

Informații generale

Test de cultivare pe mediu special al amibelor libere, din probe clinice sau prelevate, asociate cu lentilele de contact – bazat pe observarea stereomicroscopică a semnului de migrare a trofozoiților specifici pe suprafața mediului și examinarea microscopică directă a culturii dezvoltate.

Acest test are utilitate în diagnosticul morfologic al unei infecții cu Acanthamoeba spp. sau Naegleria fowleri prin exploatarea capacității de dezvoltarea a trofozoiților specifici pe mediu de cultură special.

Semnificație clinică:

Amibele libere din genul Acantamoeba spp. și Naegleria fowleri sunt protozoare / eucariote unicelulare ubiquitare cu habitare largă în mediul extern, dar care dacă ajung în organismul uman pot da infecții care, în funcție de caz, pot culmina prin deces. Calea de intrare și cursul clinic al infecțiilor variază în funcție de tipul de amibă implicat.

Naegleria fowleri cauzează de obicei meningoencefalită amoebiană primară, rapid progresivă, dobândită în timpul contactului cu apa dulce contaminată, inclusiv înotul și scufundarea acvatică în lacuri cu apă stagnantă sau prin irigare nazală cu apă nesterilă. În timpul contactului, amibele intră în sinusurile nazale și călătoresc de-a lungul filetelor nervilor olfactivi în SNC, ducând la deces în absența administării precoce a tratamentului adecvat în maxim 10 zile de la expunere. Din cauza rarității infecției, cât și din cauza dificultății în detectarea inițială, aproximativ 75% din diagnostice sunt puse după decesul pacientului.

Acanthamoeba spp. provoacă infecții rare, dar severe, ale polului anterior al globului ocular, tegumentului, mucoaselor sinusale, plămânilor și sistemului nervos central (SNC). Este un parazit care ocupă diverse nișe ecologice (de la sol, praf la apa dulce și salină). Infecția este dobândită prin inhalare, contaminarea microleziunilor preexistente la nivel cutanat sau osos exclusiv la persoanele cu imunodeficiență severă, cum ar fi primitorii de transplant de organ și pacienții cu SIDA. Parazitul mai poate pătrunde în organism și la nivelul corneei, fie în urma utilizării lentilelor de contact (prin neglijarea condițiilor aseptice de menținere a acestora, a soluților de curățare sau a cutiilor de depozitare a lentilelor), fie în urma unui traumatism, ducând la cea mai frecventă formă clinică de infecție cu Acanthamoeba – keratita amoebiană – care se poate asocia cu cicatrici extinse și orbire, dacă nu este tratată. În comparație cu infecția corneană, implicarea SNC este rară, dezvoltată secundar și exprimată clinic exlusiv la pacienții imunodeficitari. În acest ultim caz, boala evoluează sub forma unei encefalite amoebiene granulomatoase, care poate mima un abces cerebral de altă etiologie, meningită aseptică sau cronică sau un neoplasm și care, în absența tratamentului, poate duce la deces.

Proba: variază – LCR (lichid cefalorahidian), prelevate tisulare (raclat cornean superficial / profund; tampon ocular/cornean; raclat cutanat / mucocutanat, aspirat cutanat); soluție lentile de contact – proaspăt recoltate. Raclatul cornean se recoltează pe tampon fosfat salin 0.5x. Prelevatele de la nivelul tegumentului se recoltează pe 1 ml ser fiziologic steril / mediu esențial minimal / mediu de transport tipic pentru virusuri.

Cantitatea:

• minim 0,5 ml – 1 ml LCR;
• 0,2 g – 0,5 g material tisular / 1 ml fluid tisular;
• 1 ml – 50 ml soluție lentile de contact.

Condiţii de transport: într-un tub de cetrifugă din plastic / recipient gen urocultor, steril. Temperatura ambiantă, interval de temperatură preferat pentru transport între 24 °C și 28 °C.

Interval de transport: în cel mai scurt timp de la momentul recoltării (mai puțin de 30 de minute LCR, între 2 și 24 de ore pentru celelalte prelevate).

Timp eliberare rezultate: după 14 zile lucrătoare (timp analitic minim 1o zile).

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat negativ sau pozitiv:

• Rezultatul pozitiv indică prezența trofozoiților speciei Acanthamoeba sau Naegleria fowleri.

Observație:

Deși rezultatul pozitiv este un indicator foarte specific al existenței unei boli, el ar trebui să fie corelat simptomatologiei, constatărilor clinice, imagistice și în funcție de caz cu examenul oftalmologic confocal.

Recomandăm suplimentar pentru completarea diagnosticului, testul: „Detecție microscopică a amibelor libere prin metoda frotiu-colorații permanente”.

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00