Identificarea serogrupurilor/serotipurilor de Escherichia coli relevante pentru boală diareică-cultură, teste biochimice, aglutinare

Descriere

Informații generale

Patotipurile diareigene de E. coli (E. coli enterotoxigen (ETEC), E. coli enterohemoragic (EHEC), E. coli enteroinvaziv (EIEC), E. coli enteroagregativ (EAggEC), E. coli enteropatogen (EPEC), E. coli enteroaderent difuz (DAEC)) sunt implicate frecvent în sindroamele diareice și Sindromul Hemolitic Uremic, mai ales la copil.

Identificarea serogrupurilor/serotipurilor de Escherichia coli relevante pentru boală diareică, izolate din produse biologice umane (materii fecale), se realizează prin cultivarea pe medii de cultură specifice, caracterizarea fenotipică – teste biochimice clasice, metode automate (Vitek 2C, MALDI – TOF) și aglutinarea pe lamă utilizând seruri specifice aglutinante comerciale.

 

Proba:

1. Materii fecale:

Prelevarea din masa fecaloidă proaspăt emisă (cantitate – 5 g / aprox. un bob de mazare – scaun semilegat sau 5 ml – scaun lichid) se face cu tamponul (prin rotirea tamponului în trei zone diferite ale bolului fecal) sau cu „lingurița” coprorecoltorului, din diferite porțiuni care pot conține urme de mucus, sânge (atunci când ele există).

Proba se include într-un recipient cu mediu de transport Cary-Blair (se omogenizează în mediul de transport).

 

Important:

• materiile fecale trebuie colectate imediat după debutul sindromului diareic < 4 zile;
• este indicat ca recoltarea să se realizeze înainte de inițierea terapiei cu antibiotic;
• se recomandă colectarea a 2 sau 3 probe în zile diferite (pentru creșterea șanselor de izolare);
• în cazul mediului lichid, asigurați-vă că mediul NU se varsă în timpul acestor manevre;
• NU se introduce o cantitate mai mare de fecale în recipient, deoarece doar proba introdusă în mediu de transport este stabilă.

 

1. Culturi bacteriene:

– cultura totală (primară) obținută din materii fecale prin cultivare pe mediu selectiv (MacConkey, SMAC);

– tulpinile de E. coli pozitive la aglutinarea cu seruri aglutinante polivalente specific și izolate din materii fecale, se vor trimite pentru confirmare și caracterizare suplimentară pe medii solide precum:

– geloză nutritivă (plăci sau tuburi);

– mediu selectiv (MacConkey, SMAC).

 

În cazul sindroamelor hemolitice uremice se trimit:

– probă de materii fecale pozitivă la testul rapid pentru toxina Shiga;

– probă de materii fecale pozitivă la testul PCR pentru genele stx1 și stx2;

– tulpina de Escherichia coli pozitivă la testul de agluitinare pe lama cu ser anti E. Coli O157;

– tulpină de E. coli sorbitol negative pe agar MacConkey cu sorbitol;

– cultură totală (primară) lactozo-pozitivă pe agar MacConkey, SMAC etc.

 

Transport

1. Materii fecale:

– orice prelevat care nu se însămânțează pe medii de izolare (îmbogațire sau selective) într-un interval de minimum 2 ore trebuie supus unui proces de conservare în medii speciale: mediu semisolid Cary-Blair (care poate asigura o bună conservare la temperatura mediului ambiant până la 24-48 ore).

Dacă proba urmează a fi procesată în 24 ore, majoritatea probelor pot fi păstrate la temperatura camerei.

 

1. Culturi bacteriene inoculate pe medii de cultură specifice sau pe medii de transport și/sau stocare:

Transportul trebuie să fie făcut în condiții de siguranță, cât mai rapid (în maximum 24 ore).

 

Interval biologic de referință / UM:

Proba se testează față de serogrupuri de Escherichia coli: O26, O103, O111, O145, O157, O55, O119, O126, O125, O127, O128, O86, O114, O121, O142, O104, O45, O124, O28, O112, O136, O144, O29, O143, O152, O164.

 

Raportarea rezultatului: 2-5 zile lucrătoare

Analiză acreditată RENAR

 

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00