Detectarea protozoarelor în probă de materii fecale concentrată, prin microscopie optică pe frotiu colorat Tricrom

Descriere

Informații generale

Test dedicat în principal detecției microscopice a protozoarelor intestinale din categoria amibe și flagelate, prin tehnica de colorare permanentă Tricrom modificat.

Testul are utilitate în principal în diagnosticul diferențial morfologic al amibelor intestinale patogene versus nepatogene din genul Entamoeba și al flagelatelor Dientamoeba fragilis și Giardia intestinalis.

Semnificație clinică:

La om, infecțiile parazitare enterice pot evolua asimptomatic, dar se pot asocia cu diaree și / sau cu alte semne de gastroenterită.

1. Genul Entamoeba include mai multe specii, dintre care șase se găsesc în intestinul gros uman (Entamoeba histolytica, Entamoeba dispar, Entamoeba moshkovskii, Entamoeba coli, Entamoeba hartmanni și Entamoeba polecki). Singura amibă patogenă, E. histolytica, este identică morfologic prin stadiile de chist și trofozoit cu amibele cu caracter mai degrabă nepatogen – E. dispar și E. moshkovskii. Caracteristicile clinice ale amibiazei cu E. histolytica variază de la colonizarea asimptomatică (90% dintre cazuri) la dizenteria amoebiană (diaree severă cu scaune muco-pio-sangvinolente) și boli extraintestinale invazive, cel mai frecvent sub formă de abcese hepatice.
2. Clasificată inițial ca o amibă, Dientamoeba fragilis este de fapt un flagelat și poate fi asociată unui sindrom gastrointestinal cu diaree. Modul său de transmitere rămâne neclar și au fost sugerate atât calea digestivă, cât și cea vectorială. În ciuda frecvenței relativ ridicate a infecțiilor cu D. fragilis, acesta protozoar este încă neglijat ca agent patogen semnificativ, în absența aplicării de rutină a investigațiilor de laborator țintite.
3. Giardia lamblia (sinonime Giardia duodenalis / Giardia intestinalis) este un protozoar flagelat cu habitare duodenala și implicare deosebită în inducerea unei boli diareice. Infecția este dobândită digesiv prin apa sau alimentele contaminate. În baza analizei moleculare, Giardia lamblia poate fi subdivizată în 8 ansambluri genetice diferite (A, B, C, D, E, F, G și H), omul putând fi infectat în special cu ansamblurile A și B.

Proba:

1. Materii fecale proaspăt excretate, neprezervate; din scaunul format emis spontan se recoltează câte o porţiune de mărimea unei alune, din mai multe puncte diferite ale bolului fecal (preferențial din cele bogate în mucus și / sau sânge și / sau puroi), evitând contaminarea probei cu apă sau urină sau alte materiale folosite la recoltare.
2. Materii fecale recoltate imediat sau în maxim 30 de minute de la emisie, pe un prezervant – formol 10% sau 5%. [La cerere, laboratorul poate pune la dispoziția solicitantului coprorecoltoare cu prezervant de acest gen].

 

Pregătire pacient:

Pacientul va evita:

– înainte de recoltare: examenul radiologic gastrointestinal baritat, administrarea de laxative;

– în săptămâna premergătoare recoltării, administrarea anumitor medicamente: bismut, Metamucil, uleiuri minerale, Tetraciclină, antiamoebiene, antidiareice, antiacide.

Cantitatea: pentru 1 probă / zi =  minim 5 ml – 10 ml materii fecale lichide / semilichide; minim 5 g – 10 g materii fecale semilegate / formate.

Condiţii de transport: Coprorecoltor steril, fără mediu, cu capac înfiletat, în volum de 30 ml. Proba neprezervată se va transporta la temperatura ambiantă (interval de la 19 °C – 28 °C) sau în container izoterm dacă temperatura excede sau este sub intervalul optim de transport. Recipientul de colectare a probei se va introduce într-o pungă de plastic sigilată.

Interval de transport: în cel mai scurt timp posibil de la momentul emisiei / recoltării:

1. < o oră pentru scaunul apos;
2. < 2 ore pentru scaunul semilichid / semilegat;
3. recomandăbil în 4 ore pentru scaunul format; dacă proba de materii fecale formată nu este transportată în 4 ore, aceasta se va refrigera la 4 °C și va fi transportată în maxim 24 de ore de la momentul emisiei;
4. Pentru proba prezervată – în maxim 72 de ore.

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat ca pozitiv sau negativ:

• Negativ – absență elemente parazitare;
• Pozitiv – prezență elemente parazitare (genul +/- specia parazitului implicat în funcție de caz).

Timp eliberare rezultate: în maxim 4 zile lucrătoare (timp analitic minim 48 de ore).

Observații:

Colorația Tricrom modificată nu are o sensibilitate și specificitate determinată.

1. Dacă se suspectează o infecție cu Entamoeba histolytica, recomandăm testul imunoenzimatic specific „Determinarea antigenelor de Entamoeba histolytica în materiile fecale prin ELISA”. Alternativ, testul „Detectarea ADN de Cryptosporidium spp., Giardia lamblia și Entamoeba histolytica în materii fecale prin real-time PCR Multiplex”, poate fi efectuat pentru a detecta acest microrganism, precum și alți agenți parazitari asociați unei boli diareice.
2. Dacă se suspectează o infecție cu Giardia lamblia, recomandăm testul imunoenzimatic specific „Determinarea antigenelor de Giardia lamblia în materiile fecale prin ELISA”. Alternativ, testul „Detectarea ADN de Cryptosporidium spp., Giardia lamblia și Entamoeba histolytica în materii fecale prin real-time PCR Multiplex”, poate fi efectuat pentru a detecta acest microrganism, precum și alti agenți parazitari asociați unei boli diareice.
3. Dacă se suspectează o infecție cu Dientamoeba fragilis: recomandăm testul genetic „Detectarea ADN de Blastocystis hominis și Dientamoeba fragilis în materii fecale prin real-time PCR Multiplex”, pentru a detecta acest microrganism și un alt agent parazitar asociat unei boli diareice.

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00