Detectarea Cyclospora, Cystoisospora și Cryptosporidium în probă de materii fecale concentrată, prin microscopie optică pe frotiu – colorații speciale

Descriere

Informații generale

Test dedicat detecției microscopice prin tehnica specială de colorare Ziehl-Neelsen modificată pe frotiu din fecale a oochiștilor protozoarelor coccidiene acido-alcoolo-rezistente.

Acest test se aplică atunci când se suspicionează un sindrom diareic acut de etiologie parazitară cu Cyclospora cayetannesis, Cystoisospora și Cryptosporidium spp.

Semnificație clinică:

La om, infecțiile parazitare enterice pot evolua asimptomatic, dar se pot asocia cu diaree și / sau cu alte semne de gastroenterită.

1. Cyclospora cayetanensis este un alt protozoar coccidian, antroponotic, cu implicare în inducerea unei boli diareice. Evoluția ciclosporozei este de obicei autolimitată, dar simptomatologia poate fi severă și prelungită în special la pacienții imunocompromiși. Transmiterea are loc digestiv, prin ingestia de alimente sau apă contaminata cu fecale. Infecția netratată se poate extinde pe câteva săptămâni și poate avea un curs recidivant.
2. Cystoisospora belli este un alt protozoar coccidian, cosmopolit, cu frecvență însă mai ridicată în regiunile tropicale și subtropicale din America de Sud și Africa. Este un parazit antroponotic, cu puternic potențial oportunist prin inducerea unei boli diareice mai severe la imunodeficitari și tendința de a forma asocieri patogene cu alte coccidii enterice (Cryptosporidium și Cyclospora). Transmiterea infecției are loc tot digestiv, cu risc alimentar și hidric sau direct interuman (risc nosocomial).
3. Cryptosporidium este un protozoar coccidian cu localizare jejuno-ileală, fiind resposabil de inducerea unei boli diareice cu evoluție adesea mai severă la imunodeprimați. Criptosporidioza umană se asociază frecvent cu 2 specii – Cryptosporidium parvum – specia zoonotică și specia antroponotică. Infecția este dobândită digestiv prin ingestia de oochiști infecțioși odată cu apa potabilă, apa de agrement, alimente contaminate sau contact cu animale de companie sau de fermă.

Proba:

1. Materii fecale proaspăt excretate, neprezervate; din scaunul format emis spontan se recoltează câte o porţiune de mărimea unei alune, din mai multe puncte diferite ale bolului fecal (preferențial din cele bogate în mucus și / sau sânge și / sau puroi), evitând contaminarea probei cu apă sau urină sau alte materiale folosite la recoltare.
2. Materii fecale recoltate imediat sau în maxim 30 de minute de la emisie, pe un prezervant – formol 10% sau 5%. [La cerere, laboratorul poate pune la dispoziția solicitantului coprorecoltoare cu prezervant de acest gen].

Pregătire pacient:

Pacientul va evita:

– înainte de recoltare: examenul radiologic gastrointestinal baritat, administrarea de laxative;

– în săptămâna premergătoare recoltării, administrarea anumitor medicamente: bismut, Metamucil, uleiuri minerale, Tetraciclina, antiamoebiene, antidiareice, antiacide.

Cantitatea: pentru 1 probă nativă =  minim 5ml – 10 ml materii fecale lichide/semilichide; minim 5 g – 10 g materii fecale semilegate/formate.

Condiţii de transport: Coprorecoltor steril, fără mediu, cu capac înfiletat, în volum de 30 ml.

Proba neprezervată se va transporta la temperatura ambiantă (interval de la 19 °C – 28 °C) sau în container izoterm, dacă temperatura excede sau este sub intervalul optim de transport.

Recipientul de colectare a probei se va introduce într-o pungă de plastic sigilată.

Interval de transport:

• Pentru proba neprezervată – în cel mai scurt timp posibil de la momentul emisiei / recoltării:
• < o oră pentru scaunul apos;
• < 2 ore pentru scaunul semilichid/semilegat;
• recomandăbil în 4 ore pentru scaunul format; dacă proba de materii fecale formată nu este transportată în 4 ore, aceasta se va refrigera la 4 °C și va fi transportată în maxim 24 de ore de la momentul emisiei.
• Pentru proba prezervată – în maxim 72 de ore.

Timp eliberare rezultate: în maxim 4 zile lucrătoare (timp analitic minim 48 de ore).

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat ca pozitiv sau negativ:

• Negativ – absență oochiști Cyclospora, Cystoisospora și Cryptosporidium;
• Pozitiv – prezență oochiști Cyclospora / Cystoisospora / Cryptosporidium.

Observații:

Colorația Ziehl-Neelsen modificată nu are o sensibilitate și specificitate determinată.

Dacă se suspectează o infecție cu Cryptosporidium: recomandăm testul imunoenzimatic specific „Determinarea antigenelor de Cryptosporidium spp. în materiile fecale prin ELISA”. Alternativ, testul „Detectarea ADN de Cryptosporidium spp., Giardia lamblia și Entamoeba histolytica în materii fecale prin real-time PCR Multiplex”, poate fi efectuat pentru a detecta acest microrganism, precum și alti agenți parazitari asociați unei bolii diareeice.

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00