Determinarea anticorpilor IgM specifici COVID-19 (nucleocapsida) în ser prin ELISA

Descriere

Informații generale

Diagnosticul de laborator include determinarea semicantitativă a anticorpilor de tip IgM specifici virusului SARS-CoV-2 prin metoda ELISA (Enzyme-linked Immunosorbent Assay) în serul sanguin.

Determinarea imunoenzimatică a anticorpilor din clasa IgM, specifici virusului SARS-CoV-2, se realizează prin utilizarea unor plăcuțe cu godeuri tapetate cu proteina nucleocapsidică modificată (NCP). IgM din proba de testat, specific virusului SARS-CoV-2, se va lega de antigenul viral de pe suprafața plăcii, fiind detectat de soluția conjugată formată din anticorpii specifici, marcați cu enzima peroxidază. Complexul imun format va fi vizualizat cu substratul TMB (tetrametilbenzidina), rezultând o reacție colorimetrică, iar intensitatea acesteia este proporțională cu cantitatea de anticorpi din probă.

 

Pregătire pacient

Tipul probei este sânge venos, recoltat prin puncție venoasă periferică, ȋn tub de biochimie cu capac roșu fără anticoagulant; pacientul nu necesită pregătire suplimentară. Se resping probele hemolizate.

Probele se depozitează la temperaturi între +2°C și +8°C până la maxim 6 zile. Ulterior, probele vor fi depozitate la -20 °C.

 

Semnificație clinică

Diagnosticul SARS-CoV-2 este realizat pe baza simptomelor clinice şi a identificării anticorpilor specifici prin teste ELISA. Anticorpii IgM pot fi detectaţi după ~3-7 zile de la debutul simptomelor.

Coronavirusurile (CoVs) sunt virusuri ARN monocatenare ce aparțin ordinului Nidovirale, familia Coronaviridae, care pot infecta atât omul, cât și animalele domestice și sălbatice.

Genomul Coronavirusului codifică 4 proteine structurale principale: proteina N (nucleocapsida), care reprezintă practic nucleul virusului ce cuprinde ARN-ul viral, proteina M (membranară), proteina E (anvelopa virală) și proteina S (spike), o glicoproteină transmembranară de suprafață, care dă aspectul de „coroană” datorită structurii trimerice.

Anticorpii sunt proteine de natură proteică cu rol în recunoașterea antigenelor care pătrund în organism și au capacitatea de a le neutraliza datorită unor situsuri specifice de complementaritate, denumite complexe imune, care ulterior sunt recunoscute de macrofage și ȋmpreună cu ele distrug agentul străin din corp. Virusul SARS-CoV-2 declanșează un răspuns imun complex, ceea ce conduce la producerea de anticorpi anti-SARS-CoV-2 de tip IgM (apar imediat după infecție) și IgG (implicați in imunitatea pe termen lung și memoria imunologică).

 

Interval biologic de referință / rezultat

Interpretare rezultate, evaluare semicantitativă: rezultatele sunt exprimate sub forma: negativ, echivoc și pozitiv.

Limite și interferențe:

Un rezultat negativ semnifică absența expunerii la virusul SARS-CoV-2 și posibilitatea contactării lui în viitor. O valoare serologică negativă nu exclude diagnosticul de infecție. În stadiul incipient al acestei afecțiuni, anticorpii pot să nu fie prezenți încă, sau să fie prezenți în cantități foarte mici astfel încât să nu fie detectați. Dacă suspiciunea clinică pentru infecția cu virusul SARS-COV-2 persistă, atunci se pot aplica alte metode de diagnostic.

Un rezultat IgM pozitiv cu sau fără IgG prezent indică o infecție recentă cu virusul SARS-CoV-2, în timp ce IgG pozitiv cu IgM negativ reprezintă dovada unei expuneri anterioare ȋndepartate, în urma căreia s-a obținut imunitate specifică.

În caz de rezultat echivoc se recomandă recoltarea serului II la 7 zile distanţă faţă de serul I şi se retestează în paralel.

 

Raportarea rezultatului: 3 zile lucrătoare

 

Interval de recoltare
Luni-Vineri: 07:30-11:00