Determinarea anticorpilor IgG anti – Leishmania în ser prin WESTERN-BLOT

Descriere

Informații generale

Test imunoblot de detecție calitativă a anticorpilor de tip IgG anti-Leishmania în ser.

Utilitate în confirmarea sau infirmarea serologică a diagnosticului de leishmanioză cu L. infantum (decelat printr-un test de screening ELISA).

Semnificație clinică:

Diversele specii de Leishmania sunt încadrate ca protozoare tisulare din categoria hemoflagelatelor și sunt agenți etiologici ai leishmaniozei, care poate îmbrăca diverse forme clinice, în funcție de specie și zona geografică.

Se profilează 3 grupuri mari de leishmanioze:

• Cutanată / ”Buton de orient”;
• Muco-cutanată;
• Viscerală /”Boala kala-azar”.

Leishmaniozele predomină în regiunile cu climat tropical și subtropical (cele cutanate sunt întâlnite frecvent în țările lumii vechi; leishmaniozele muco-cutanate sunt endemice zonelor din lumea nouă; leishmaniozele viscerale au o distribuție relativ cosmopolită fiind întâlnite inclusiv în țările europene din zona Bazinului Mediteranean).

Toate leishmaniozele intră în categoria bolilor parazitare cu transmitere vectorială fiind dobândite în urma întepăturii unei musculițe de nisip, hematofage (Phlebotomus spp. / Lutzomia spp.).

În toate cele 3 grupuri de leishmanioze, infecția are o evoluție intracelulară prin stadiul parazitar amastigot, care vizează distrugerea celulelor sistemului reticulo-endotelial din: derm (leishmaniozele cutanate), țesut muco-cutanat, cartilaginos +/- osos (leishmaniozele muco-cutanate) și ficat, splină, măduvă osoasă, ganglioni limfatici (leishmanioza viscerală). În etiologia bolii kala-azar sunt implicate 3 specii: Leishmania donovani, Leishmania chagasi sau Leishmania infantum.

Diagnosticul definitiv necesită identificarea microscopică a amastigoților caracteristici, intracelulari, pe frotiurile colorate din diverse aspirate tisulare, în funcție de forma clinică de leishmanioză suspicionată. De asemenea, detectarea anticorpilor serici constituie o metodă alternativă noninvazivă pentru diagnosticarea unei leishmanioze viscerale.

Proba: 2 ml ser (recoltarea sângelui venos în vacutainer fără anticoagulant; centrifugare sânge cu recoltare supernatant seric sau recoltare sânge în vacutainer cu separator de ser).

Condiţii de transport: tub steril; la o temperatură între 4 °C și 8 °C. Tub secundar în container izoterm cu gheață umedă.

Interval de transport: maxim 24 de ore de la recoltare.

Timp eliberare rezultate: după 2-10 zile lucrătoare. Testul se lucrează în raport cu volumul de probe și de regulă o dată pe săptămână sau maxim la 2 săptămâni (timpul analitic fiind de o zi).

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat negativ sau pozitiv:

• Negativ – Absența profilului de benzi antigenice specific unei infecții cu Leishmania infantum;
• Pozitiv – Prezența anticorpilor IgG anti infantum.

Observație:

Rezultatul serologic trebuie interpretat în funcție de informațiile disponibile la nivel epidemiologic și clinic.

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00