Determinarea anticorpilor IgA anti-Toxoplasma gondii în ser prin WESTERN-BLOT

Descriere

Informații generale

Test imunoblot de detecție calitativă a anticorpilor de tip IgA anti-Toxoplasma gondii în ser sangvin.

Utilitate: în confirmarea sau infirmarea unui rezultat pozitiv sau echivoc de anticorpi IgA anti-Toxoplasma gondii, obținut prin testul de screening ELISA, efectuat pe aceeași probă de ser.

Semnificație clinică:

Toxoplasma gondii este un protozoar intracelular obligatoriu, capabil să infecteze o varietate de gazde intermediare, inclusiv omul. Gazda definitivă este reprezentată de pisică; aceasta, odată infectată va elimina oochiști care devin infecțioși în sol.

Toxoplasmoza este dobândită de către om cel mai adesea digestiv:

• prin ingestia de carne crudă sau insuficient prelucrată termic, care conține chiști tisulari viabili;
• prin intermediul mâinilor murdare, în urma contactului cu pisica infectată / consumului de alimente sau apă contaminate cu oochiști din fecalele pisicii;
• rar prin consum de lapte crud / lactate nepasteurizate, contaminate cu tahizoiți viabili.

La femeia gravidă, cu primoinfecție recentă, dobândită în cursul sarcinii, există riscul de transmitere transplacentară a parazitului cu potențial de dezvoltare a unei toxoplasmoze congenitale. Incidența toxoplasmozei congenitale crește pe măsură ce sarcina avansează spre termen. În schimb, severitatea infecției congenitale variază invers proporțional cu vârsta sarcinii, fiind mai ridicată atunci când transmiterea transplacentara a parazitului a avut loc în primul trimestru de sarcină. Majoritatea sugarilor infectați in utero sunt asimptomatici la naștere, în special dacă infecția maternă a avut loc în timpul celui de-al treilea trimestru, sechelele apărând mai târziu în viață. Toxoplasmoza congenitală are ca rezultat o boală severă generalizată sau neurologică la aproximativ 20 % până la 30 % dintre sugarii infectați in utero. Aproximativ 10 % prezintă doar o implicare oculară, iar restul sunt asimptomatici la naștere. Infecția subclinică poate duce la naștere prematură și patologii neuropsihice sau audiologice subsecvente.

În urma unei infecției primare, cronic, parazitul poate rămâne într-o formă latentă de multiplicare în organismul gazdei, fără a induce vreo simptomatologie atâta timp cât pacientul rămâne imunocompetent. Infecțiile severe-fatale pot apărea în rândul pacienților imunodeficitari HIV+ în stadiul SIDA sau al persoanelor imunosupresate nonHIV. La acestă categorie de pacienți, în  cazul unei toxoplasmoze cronice-latente, poate avea loc fenomenul de reactivare a infecției, ce implică de obicei afectarea sistemului nervos central (neurotoxoplasmoză).

Proba: ser (recoltare sânge venos sau sânge din cordonul ombilical în vacutainer fără anticoagulant; centrifugare sânge cu recoltare supernatant seric sau recoltare sânge în vacutainer cu separator de ser);

Cantitatea: 2 ml ser; recomandăm refrigerarea imediat după colectare.

Condiţii de transport: tub steril; temperatura 2 – 8 °C. Tub secundar în container izoterm cu gheață umedă.

Interval de transport: maxim 24 de ore de la recoltare

Timp eliberare rezultate: după 2-10 zile lucrătoare. Testul se lucrează în raport cu volumul de probe și de regulă o dată pe săptămână sau maxim la 2 săptămâni (timpul analitic fiind de o zi).

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat negativ / pozitiv / echivoc:

• Negativ: absența profilului intens de benzi antigenice specifice;
• Pozitiv: prezența cel puțin a unei benzi antigenice (de intensitate mai mare decât cut-off-ul), caracteristică profilului de benzi indicatoare pentru o infecție toxoplasmică acută;
• Echivoc: prezența cel puțin a unei benzi antigenice (de intensitate egală cut-off-ului), caracteristică profilului de benzi indicatoare pentru o infecție acută. În acest caz, recomandăm repetarea testării pe o nouă probă recoltată după 2–6 săptămâni, ținând cont de caracteristicile specifice bolii.

Observație:

Recomandăm pentru diagnosticul final ca oricare constatare serologică prin imunoblotare să fie interpretată în contextul rezultatelor obținute prin alte analize imunoenzimatice de tip ELISA pentru anticorpi specifici (IgM, IgA, IgE, IgG), în baza prezentării clinice a pacientului și a informațiilor disponibile la nivel epidemiologic și imagistic.

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00