Detectarea rapidă a Cryptosporidium spp. & Giardia lamblia în materiile fecale prin imunofluorescență directă

Descriere

Informații generale

Test de imunofluorescenţă directă pentru detectarea antigenelor de pe suprafata pereților chiștilor de Giardia lamblia și oochiștilor de Cryptosporidium spp.

Testul de imunofluorescență directă poate fi utilizat și în screening, dar și în confirmarea unei criptosporidioze și / sau giardioze la subiectul cu sindrom diareic acut.

Semnificație clinică:

La om, infecțiile parazitare enterice pot evolua asimptomatic, dar se pot asocia cu diaree și / sau cu alte semne de gastroenterită.

1. Giardia lamblia (sinonime Giardia duodenalis / Giardia intestinalis) este un protozoar flagelat cu habitare duodenală și implicare deosebită în inducerea unei boli diareice. Infecția este dobândită digesiv prin apa sau alimentele contaminate. În baza analizei moleculare, Giardia lamblia poate fi subdivizată în 8 ansambluri genetice diferite (A, B, C, D, E, F, G și H), omul putând fi infectat în special cu ansamblurile A și B.
2. Cryptosporidium este un protozoar coccidian cu localizare jejuno-ileală, fiind resposabil de inducerea unei boli diareice cu evoluție adesea mai severă la imunodeprimați. Criptosporidioza umană se asociază frecvent cu 2 specii – Cryptosporidium parvum – specia zoonotică și specia antroponotică. Infecția este dobândită digestiv prin ingestia de oochiști infecțioși odată cu apa potabilă, apa de agrement, alimente contaminate sau contact cu animale de companie sau de fermă.

Proba:

1. Materii fecale proaspăt excretate, neprezervate; din scaunul format emis spontan se recoltează câte o porţiune de mărimea unei alune, din mai multe puncte diferite ale bolului fecal (preferențial din cele bogate în mucus și / sau sânge și / sau puroi), evitând contaminarea probei cu apă sau urină sau alte materiale folosite la recoltare.
2. Materii fecale recoltate imediat sau în maxim 30 de minute de la emisie, pe un prezervant – formol 10% sau 5% sau Total Fix. [La cerere, laboratorul poate pune la dispoziția solicitantului coprorecoltoare cu prezervant de acest gen].

Pregătire pacient:

Pacientul va evita:

– înainte de recoltare: examenul radiologic gastrointestinal baritat, administrarea de laxative;

– în săptămâna premergătoare recoltării, administrarea anumitor medicamente: bismut, Metamucil, uleiuri minerale, Tetraciclina, antiamoebiene, antidiareice, antiacide.

Cantitatea: pentru 1 probă nativă =  minim 5ml -10 ml materii fecale lichide/semilichide; minim 5 g – 10 g materii fecale semilegate/formate.

Condiţii de transport: Coprorecoltor fără mediu, steril, cu capac înfiletat, în volum de 30 ml.

Proba neprezervată se va transporta la temperatura ambiantă (interval varia de la 19 °C – 28 °C) sau în container izoterm, dacă temperatura excede sau este sub intervalul optim de transport.

Recipientul de colectare a probei se va introduce într-o pungă de plastic sigilată.

Interval de transport:

• Pentru proba neprezervată – în cel mai scurt timp posibil de la momentul emisiei / recoltării:
  • < o oră pentru scaunul apos;
  • < 2 ore pentru scaunul semilichid/semilegat;
  • recomandăbil în 4 ore pentru scaunul format; dacă proba de materii fecale formată nu este transportată în 4 ore, aceasta se va refrigera la 4 °C și va fi transportată în maxim 24 de ore de la momentul emisiei.
• Pentru proba prezervată – în maxim 72 de ore.

 

Timp eliberare rezultate: în maxim 4 zile lucrătoare (timp analitic minim 48 de ore).

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat ca pozitiv sau negativ:

• Negativ – absență oochiști Cryptosporidium / chiști Giardia lamblia;
• Pozitiv – prezență oochiști Cryptosporidium / chiști Giardia lamblia.

Observații:

Colorația Ziehl-Neelsen modificată nu are o sensibilitate și specificitate determinată.

Dacă se suspectează o coinfecție cu Cryptosporidium și Giardia, recomandăm testul „Detectarea ADN de Cryptosporidium spp., Giardia lamblia și Entamoeba histolytica în materii fecale prin real-time PCR Multiplex”, care poate fi efectuat pentru a detecta aceste microrganisme, precum și un alt agent parazitar asociat unei bolii diareice.

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00