Detectarea microscopică a microfilariilor în sânge prin metoda filtrării prin membrană

Descriere

Informații generale

Test pentru detecția microscopică a microfilariilor sangvine la pacientul suspect de filarioză, bazat pe metoda de filtrare pe membrană Nucleopore. Acest test implică o examinare microscopică directă a filtratului. Se va efectua și o colorare Giemsa pentru identificare gen, la un cost suplimentar.

Test de concentrare util în infecțiile minore, date de filariile cu stadii de evoluție în sânge din genul Wuchereria bancrofti, Brugia malayi, Brugia timori, Loa loa, Mansonella perstans și Mansonella ozzardi la pacienții simptomatici cu istoric pozitiv de călătorii în zone endemice de risc/ nativii din acele zone de risc.

Semnificație clinică:

Filariile sunt nematode evoluate, care provoacă o morbiditate umană semnificativă în regiunile tropicale din întreaga lume. Adulții macroscopici trăiesc în gazda umană și produc descendenți microscopici (microfilarii) în sânge sau piele. Microfilariile Wuchereria bancrofti, Brugia malayi, Brugia timori, Loa loa, Mansonella perstans și Mansonella ozzardi sunt stadii parazitare cu evoluție sangvină, în timp ce microfilariile Onchocerca volvulus și Mansonella streptocerca se localizează subcutanat. Transmiterea infecțiilor are loc tot vectorial, prin mușcătura unor insecte hematofage (țânțari –  Anopheles, Culex, Aedes, Mansonia; muște negre – Simulium spp.; muște roșii – Chrysops spp.). W. bancrofti și specia Brugia provoacă o afecțiune gravă numită filarioză limfatică. W. bancrofti este întalnit în zonele tropicale, în timp ce speciile de Brugia sunt întâlnite în anumite părți ale Asiei și Asiei de Sud-Est. Loa loa este limitat la Africa, provocând prin viermele adult un angioedem subcutanat migrator, denumit „edem de Calabar” și ocazional o conjuctivită dureroasă. M perstans și M ozzardi induc o formă relativ ușoară de filarioză. Pacienții sunt adesea asimptomatici. M perstans este întâlnit în anumite părți ale Africii și Americii de Sud, în timp ce M. ozzardi este limitat doar la Mexic și America Centrală și de Sud.

Microfilariile acestor viermi pot fi observate pe picăturile groase și frotiurile din sânge, ceea ce permite identificarea lor definitivă. Cu toate acestea, microfilariile pot fi în număr redus și, prin urmare, utilizarea metodelor de concentrare, gen filtrare prin membrana Nucleopore îmbunătățește sensibilitatea de detecție. Amicrofilaremia sangvina cu W. bancrofti sau Brugia este valabila în infecțiile cronice și în reacțiile de hipersensibilitate de tipul „Plămânului tropical” – situație în care o soluție de diagnostic ar constitui-o detectarea serologică a anticorpilor anti-Filaria în serul pacientului.

Proba: Sânge venos proaspăt recoltat pe anticoagulant (preferabil 3,2% citrat de sodiu).

Instrucțiuni de recoltare a probei:

Anumite microfilarii au o periodicitate nocturnă sau diurnă, prin urmare recoltarea sângelui trebuie programată pentru a corespunde cu prezența microfilariilor în circulația periferică. Pentru agenții filariozei limfatice (Wuchereria bancrofti și specia genului Brugia), sângele trebuie recoltat între orele 22:00 și 2 a.m., în timp ce pentru detecția lui Loa loa, sângele trebuie recoltat între 10 a.m. și 2 p.m.

Microfilariile din speciile genului Mansonella nu prezintă nicio periodicitate și, prin urmare, este acceptabilă o recoltare aleatorie a sângelui.

Cantitate: întreaga cantitate de sânge venos recoltat per tub – 4,5 ml (minim volum acceptat 2,5 ml / tub).

Condiții de transport: vacutainer steril, transport la temperatura ambiantă (de preferat) sau la o temperatură situată între 2 °C și 8 °C) cu vacutainer secundar, în container izoterm cu gheață umedă în raport cu durata transportului.

Interval de transport: preferabil imediat după recoltare, în maxim ore la temperatura ambiantă ; în maxim 24 ore de la recoltare, la temperatura  (2oC…8 °C)

Timp de eliberare rezultate: timp analitic de minim 48 de ore – maxim 4 zile lucrătoare, în funcție de caz.

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat negativ sau pozitiv:

• Rezultatul pozitiv este furnizat cu genul +/- specia de microfilarie, dacă este identificabilă.

Observație:

Recomandăm suplimentar, pentru completarea diagnosticului, identificarea genului de microfilarii, testul „Diagnosticul microscopic al malariei, microfilariozelor, tripanosomiozelor, babesiozelor prin metoda frotiu și picatură groasă”.

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00