Detectarea ADN de Coxiella burnetii prin real-time PCR

Descriere

Informații generale

Testul real-time PCR pentru detectarea genomului bacteriei Coxiella burnetii se efectuează pentru confirmarea suspiciunii de febră Q acută, deoarece permite detectarea prezenței genomului specific acestei bacterii în proba biologică a pacientului, prelevată în primele 14 zile de la debutul simptomelor clinice, în cazul suspiciunii de febră Q acută. De asemenea, testul este indicat pe probe de sânge, ser sau probe de valve cardiace pentru confirmarea diagnosticului de febră Q cronică.

Pregătire pacient

Probe: ser, sânge sau probe bioptice

Probe utilizate în diagnosticul febrei Q acute: ser sau sânge prelevate în primele 14 zile de la debutul simptomelor clinice.

Probe utilizate în diagnosticul febrei Q cronice: ser, sânge sau probe bioptice prelevate la peste 6 săptămâni de la infecția acută.

Serul (în cantitate de 1 ml) este recoltat în tub de biochimie cu capac roșu.

Sângele (în cantitate de 1 ml) este recoltat în tub cu anticoagulant (EDTA).

Probele bioptice prelevate de la pacienții cu afecțiuni cardiace (valvulopatii, vegetații pe valvele cardiace) trimise în recipient steril cu capac bine închis.

Transportul probelor de ser, sânge sau probe bioptice către laborator se face în recipient izoterm cu gheață sau pachete refrigerate, la rece (între +2 și +8 °C), în maxim 24 de ore de la primire.

Semnificație clinică

Coxiella burnetii este o bacterie parazit obligat intracelulară, care determină febra Q, o zoonoză transmisă omului cel mai adesea prin contactul cu animalele de fermă infectate. Infecţia la om apare prin inhalarea de aerosoli contaminaţi din fluidele amniotice sau placentă, precum şi prin contactul cu lâna animalelor contaminate. Animalele de fermă (ovine, bovine, caprine) sunt rezervoarele principale pentru febra Q, dar și câinii şi pisicile pot fi de asemenea infectate şi pot transmite omului agentul patogen, ceea ce explică focarele epidemice din zonele urbane. Animalele infectate sunt adesea asimptomatice, dar elimină un număr masiv de microorganisme infectante prin ţesuturile placentare, urină şi fecale. De asemenea, mamiferele elimină Coxiella burnetii în lapte, astfel consumul de lapte nepasteurizat reprezintă o sursă alternativă (mai rară) de infecţie.

Febra Q se prezintă sub 2 forme clinice: acută şi cronică, care corespund celor două faze antigenice ale răspunsului în anticorpi anti-Coxiella burnetii. În timpul infecţiei acute, răspunsul în anticorpi faţă de antigenul de fază II al Coxiella burnetii este predominant, fiind mult mai ridicat comparativ cu cel faţă de antigenul de fază I al Coxiella burnetii. Infecţia cronică este asociată cu creşterea titrului anticorpilor IgG anti-fază I.

În febra Q acută, ~50% dintre pacienţii adulţi sunt asimptomatici. Manifestarea clinică cea mai frecventă este boala febrilă nespecifică, care poate apărea însoţită de pneumonie sau hepatită. Cele mai frecvent raportate simptome ale febrei Q acute sunt: febră > 39 °C, oboseală, frisoane, cefalee şi mialgie. Febra persistă de obicei 1-2 săptămâni.

Febra Q cronică este rară, fiind detectată la < 5% dintre persoanele cu infecţie acută în absenţa tratamentului şi poate apărea la câteva luni, ani sau chiar decenii după infecţia acută iniţială. Endocardita reprezintă 60-78% din cazurile de febră Q cronică din întreaga lume, fiind manifestarea clinică majoră a formei cronice a febrei Q. Rareori, boala poate să îmbrace o formă cronică severă, caracterizată prin endocardită, hepatită cronică şi sindromul de oboseală cronică.

Diagnosticul de laborator curent se bazează pe determinarea nivelului de anticopi specifici față de antigenele de fază I și II de Coxiella burnetii. Obţinerea unor titruri de anticorpi faţă de antigenele de faza II mai mari sau egale cu cele ale anticorpilor faţă de antigenele de fază I indică o infecţie acută/activă.

Obţinerea unor titruri de anticorpi de fază I mai mari sau egale cu cele ale anticorpilor de fază II sunt sugestive pentru infecţia cronică sau pentru faza de convalescenţă a febrei Q.

Interval biologic de referință / rezultat

Prezența ADN de Coxiella burnetii indică faptul că pacientul are febra Q.

Prezența ADN de Coxiella burnetii în probele de ser / sânge în primele zile de la debutul simptomelor clinice poate semnifica febra Q acută, în timp ce prezența ADN de Coxiella burnetii în probe de ser /sânge și mai ales valve cardiace prelevate la luni /ani de zile de la debutul primelor simptome sugestive de febră Q semnifică prezența formei cronice a febrei Q.

Raportarea rezultatului: 1-5 zile lucrătoare

Interval de recoltare
Luni-Vineri: 07:30-11:00