Detectarea ADN Cryptosporidium spp., Giardia lamblia și Entamoeba histolytica în materii fecale prin real–time PCR Multiplex

Descriere

Informații generale

Test real-time PCR multiplex pentru amplificarea, detecția și diferențierea simultană a ADN-ului specific unui panel de protozoare parazitare, precum Cryptosporidium spp., Giardia lamblia, Entamoeba histolytica. Nepatogenul Entamoeba dispar nu este detectat.

Acest test poate fi utilizat în confirmarea diagosticului unei criptosporidioze și / sau giardioze și / sau amibiaze asociate unui sindrom gastrointestinal acut.

Semnificație clinică:

La om, infecțiile parazitare enterice pot evolua asimptomatic, dar se pot asocia cu diaree și / sau cu alte semne de gastroenterită.

1. Cryptosporidium este un protozoar coccidian cu localizare jejuno-ileală, fiind resposabil de inducerea unei boli diareice cu evoluție adesea mai severă la imunodeprimați. Criptosporidioza umană se asociază frecvent cu 2 specii – Cryptosporidium parvum – specia zoonotică și specia antroponotică. Infecția este dobândită digestiv prin ingestia de oochiști infecțioși odată cu apa potabilă, apa de agrement, alimente contaminate sau contact cu animale de companie sau de fermă.
2. Giardia lamblia (sinonime Giardia duodenalis / Giardia intestinalis) este un protozoar flagelat cu habitare duodenală și implicare deosebită în inducerea unei boli diareice. Infecția este dobândită digesiv prin apa sau alimentele contaminate. În baza analizei moleculare, Giardia lamblia poate fi subdivizată în 8 ansambluri genetice diferite (A, B, C, D, E, F, G și H), omul putând fi infectat în special cu ansamblurile A și B.
3. Genul Entamoeba include mai multe specii, dintre care șase se găsesc în intestinul gros uman (Entamoeba histolytica, Entamoeba dispar, Entamoeba moshkovskii, Entamoeba coli, Entamoeba hartmanni și Entamoeba polecki). Singura amibă patogenă, E. histolytica, este identică morfologic prin stadiile de chist și trofozoit cu amibele cu caracter mai degrabă nepatogen – E. dispar și E. moshkovskii. Caracteristicile clinice ale amibiazei cu E. histolytica variază de la colonizarea asimptomatică (90% dintre cazuri) la dizenteria amoebiană (diaree severă cu scaune muco-pio-sangvinolente) și boli extraintestinale invazive, cel mai frecvent sub formă de abcese hepatice.

Proba: Materii fecale proaspăt recoltate (fără prezervanți adăugați, imediat refrigerate).

Prelevarea materiilor fecale se face din  mai multe puncte ale scaunului (preferențial din zonele mai suspecte, cu mucus / sânge) evitând contaminarea probei cu apă sau urină sau alte materiale folosite la recoltare. Pacientul trebuie să evite cel puțin cu 7 zile înainte de recoltare să ingereze barium (caz examinare Rx tranzit baritat), bismut, medicamente anti-diareice neabsorbabile, laxative bazate pe uleiuri minerale sau antibiotice.

Cantitatea: minim 5 ml materii fecale lichide / minim 1 g materii fecale formate sau semilegate.

Condiţii de transport: tub steril, în container izoterm cu gheață umedă, temperatura 2 – 8 °C.

Interval de transport: maxim 24 de ore de la recoltare.

Timp eliberare rezultate: 2-14 zile (se lucrează în funcție de solicitări, o dată pe săptămână sau o dată la 2 săptămâni.

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat ca pozitiv sau negativ:

• Negativ – absență ADN Cryptosporidium spp., Giardia lamblia și Entamoeba histolytica la nivele detectabile;
• Pozitiv – prezență ADN Cryptosporidium spp., Giardia lamblia și Entamoeba histolytica.

Observație: Sensibilitatea de detecție a testului este de ≥ 50 copii ADN Cryptosporidium / per reacție și ≥ 10 copii ADN Giardia lamblia și Entamoeba histolytica / per reacție.

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00