Detectarea ADN Blastocystis hominis și Dientamoeba fragilis în materii fecale prin real–time PCR Multiplex

Descriere

Informații generale

Test real-time PCR multiplex pentru amplificarea, detecția și diferențierea simultană a ADN-ului specific unui panel de 2 protozoare parazitare precum Blastocystis hominis, Dientamoeba fragilis.

Acest test poate fi utilizat în confirmarea diagosticului unei infecții cu Blastocystis hominis și / sau cu Dientamoeba fragilis asociate unui sindrom gastrointestinal acut.

Semnificație clinică:

La om, infecțiile parazitare enterice pot evolua asimptomatic, dar se pot asocia cu diaree și / sau cu alte semne de gastroenterită.

1. Blastocystis este un protozoar enteric extrem de polimorf, prezent în mai multe forme (vacuolar, chist, ameboid, granular, multivacuolar și avacuolar). Patogenitatea sa rămâne controversată în baza inducerii simptomelor gastrointestinale cu caracter nespecific. Studiile recente de microbiom și metagenomică sugerează că colonizarea cu Blastocystis este de obicei asociată unei microbiote intestinale sănătoase, decât unei disbioze intestinale. Cu toate acestea, infecții simptomatice cu Blastocystis sunt mai frecvent întâlnite la pacienții cu sindrom de intestin iritabil, la cei cu HIV/SIDA și la alți indivizi imunocompromiși.
2. Clasificată inițial ca o amibă, Dientamoeba fragilis este de fapt un flagelat și poate fi asociată unui sindrom gastrointestinal cu diaree. Modul său de transmitere rămâne neclar și au fost sugerate atât calea digestivă, cât și cea vectorială. În ciuda frecvenței relativ ridicate a infecțiilor cu D. fragilis, acesta protozoar este încă neglijat ca agent patogen semnificativ, în absența aplicării de rutină a investigațiilor de laborator țintite.

Proba: Materii fecale proaspăt recoltate (fără prezervanți adăugați, imediat refrigerate).

Prelevarea materiilor fecale se face din  mai multe puncte ale scaunului (preferențial din zonele mai suspecte, cu mucus / sânge) evitând contaminarea probei cu apă sau urină sau alte materiale folosite la recoltare. Pacienții trebuie să evite cu cel puțin 7 zile înainte de recoltare să ingereze barium (caz examinare Rx tranzit baritat), bismut, medicamente anti-diareice neabsorbabile, laxative bazate pe uleiuri minerale sau antibiotice.

Cantitatea: minim 5 ml materii fecale lichide / minim 1 g materii fecale formate sau semilegate.

Condiţii de transport: tub steril, în container izoterm cu gheață umedă, temperatura 2 – 8 °C.

Interval de transport: maxim 24 de ore de la recoltare.

Timp eliberare rezultate: 2-14 zile (se lucrează în funcție de solicitări, o dată pe săptămână sau o dată la 2 săptămâni.

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat ca pozitiv sau negativ:

• Negativ – absență ADN Blastocystis hominis / Dientamoeba fragilis la nivele detectabile;
• Pozitiv – prezență ADN Blastocystis hominis / Dientamoeba fragilis.

Observație: Sensibilitatea de detecție a testului este de ≥ 10 copii ADN Blastocystis hominis și Dientamoeba fragilis / per reacție.

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00