Detectarea microscopică a Leishmania în aspirate sau raclate tisulare (țesut cutanat/muco-cutanat/măduvă osoasă hematogenă) prin frotiu – colorație Giemsa

Descriere

Informații generale

Test de detecție microscopică a amastigoților de Leishmania spp., bazat pe metoda examinării frotiului colorat Giemsa din proba suspectată.

Testul se aplică în screeningul și în confirmarea oricărei suspiciuni pentru o anumită formă de leishmanioză.

Semnificație clinică:

Diversele specii de Leishmania sunt încadrate ca protozoare tisulare din categoria hemoflagelatelor și sunt agenți etiologici ai leishmaniozei, care poate îmbrăca diverse forme clinice, în funcție de specie și zona geografică.

Se profilează 3 grupuri mari de leishmanioze:

• Cutanată / ”Buton de orient”;
• Muco-cutanată;
• Viscerală /”Boala kala-azar”.

Leishmaniozele predomină în regiunile cu climat tropical și subtropical (cele cutanate sunt întâlnite frecvent în țările lumii vechi; leishmaniozele muco-cutanate sunt endemice zonelor din lumea nouă; leishmaniozele viscerale au o distribuție relativ cosmopolită fiind întâlnite inclusiv în țările europene din zona Bazinului Mediteranean).

Toate leishmaniozele intră în categoria bolilor parazitare cu transmitere vectorială fiind dobândite în urma întepăturii unei musculițe de nisip, hematofage (Phlebotomus spp. / Lutzomia spp.).

În toate cele 3 grupuri de leishmanioze, infecția are o evoluție intracelulară prin stadiul parazitar amastigot, care vizează distrugerea celulelor sistemului reticulo-endotelial din: derm (leishmaniozele cutanate), țesut muco-cutanat, cartilaginos +/- osos (leishmaniozele muco-cutanate) și ficat, splină, măduvă osoasă, ganglioni limfatici (leishmanioza viscerală). În etiologia bolii kala-azar sunt implicate 3 specii: Leishmania donovani, Leishmania chagasi sau Leishmania infantum.

Diagnosticul definitiv necesită identificarea microscopică a amastigoților caracteristici, intracelulari, pe frotiurile colorate din diverse aspirate tisulare, în funcție de forma clinică de leishmanioză suspicionată. De asemenea, detectarea anticorpilor serici constituie o metodă alternativă noninvazivă pentru diagnosticarea unei leishmanioze viscerale.

Proba: Variază:

1. Raclat simplu din ulcerul cutanat sau cutaneo-mucos (suspiciune leishmanioză cutanată / muco-cutanată).
2. Aspirat cutanat prin prelevare cu ac fin în patul leziunii suspecte în „buton de orient” sau raclaj cutanat delicat – uneori după o infiltrare discretă a ulcerului cu 0,1 – 0,2 ml ser fiziologic în amestec cu lidocaină (în suspiciune leishmanioze cutanate ale lumii vechi).
3. Aspirat medular obținut prin puncție ososă (în suspiciunea de leishmanioza viscerală).
4. Preparate microscopice tip frotiu – gata preparate (fixate cu etanol 70 % și colorate Giemsa).

Cantitatea: 0,5 g – 1 ml prelevat tisular; cel puțin 2 prepate microscopice tip frotiu – gata preparate.

Condiţii de transport: stocare și transport prelevate doar la temperatura ambiantă. Frotiurile se transportă în anvelope semirigide, pentru a fi protejate de spargere sau de alte deteriorări.

Interval de transport: în cel mai scurt timp posibil – celeritatea este necesară mai ales în suspiciunile de leishmanioză viscerală.

Timp eliberare rezultate: variază în raport cu numărul și tipul probelor (după 2-5 zile); (timp analitic minim: 48 de ore)

Interpretare rezultate / valori de referință:

Raportat negativ sau pozitiv:

• Negativ – absența amastigoților de Leishmania Acest rezultat nu exclude o potențială leishmanioză deoarece amastigoții tisulari pot fi prezenți la niveluri sub limitele de decelare ale acestui test.
• Pozitiv – prezența amastigoților liberi sau intramacrofagici de Leishmania indică o leishmanioza activă.

Observație:

Rezultatul trebuie interpretat și în funcție de informațiile disponibile la nivel epidemiologic și clinic (faza de evoluție clinică).

Interval de recoltare

Luni-Vineri: 07:30-11:00